Lightsheet Z.1

Stellen Sie sich vor, Sie hätten Zugang zu einem Imaging-System, das optische Schnitte von großen Proben nahezu ohne Phototoxizität oder Ausbleich-Effekte und mit hoher zeitlicher Auflösung durchführen könnte.

Genau das bietet Lightsheet Z.1 von ZEISS. Das einmalige Multiview-Fluoreszenzmikroskop ermöglicht es Ihnen, die Entwicklung großer, lebender Proben aufzuzeichnen und sie schonend abzubilden, um einen außergewöhnlich hohen Informationsgehalt zu erfassen.

Es ist auch schnell: Lightsheet Z.1 ist das Werkzeug, das Sie brauchen, um optische Schnitte in bisher unerreichter Geschwindigkeit zu erstellen. Erstellen Sie Abbildungen Ihres gesamten Probenvolumens in subzellulärer Auflösung in einem Bruchteil der Zeit, die Sie mit anderen Techniken benötigen.

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• Finden Sie mit Multiview die ideale Position für Ihre Probe im Verhältnis zur Achse der Detektionsoptik.
  
• Bilden Sie komplette Proben ab, indem Sie komplementäre Informationen aus verschiedenen Blickwinkeln erfassen, bevor Sie sie in einem einfachen Nachbearbeitungsschritt wieder zusammensetzen.
• Verbessern Sie die Auflösung Ihres bearbeiteten Datensatzes, indem Sie Informationen aus verschiedenen Blickwinkeln neu kombinieren und die Bildqualität mit Dekonvolution weiter verbessern.

• Formen Sie das Lichtblatt mit Hilfe einer zylindrischen Linse und eines Scanningspiegel basierten Mechanismus.
• Profitieren Sie von einer speziellen Optik, die Ihnen auf jedem LSFM-Mikroskop optimal homogen beleuchtete optische Schnitte zeigt.
• Schützen Sie Ihre Probe durch extrem niedrige Laserintensitäten für minimales Ausbleichen.
  

• Erstellen Sie Multiview-Datensätze mit einem neuen Probenpositionierungsansatz.
• Führen Sie Experimente mit Gewebe durch, geklärt mit Scale Medium (Hama et al, Nat Neurosci. 2011) mit einem Refraktionsindex of n=1,38 oder mit wässriger Klärung mit n=1,45 (z.B. FocusClear™ von CelExplorer Labs)
• Verwenden Sie die optionale Triggerschnittstelle, um physiologisch relevante Bedingungen aufrechtzuerhalten, und profitieren Sie von der verbesserten Kombination von Bildinformationen und Umweltkontrolle.

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Gewebe-Clearing erlaubt es Ihnen, Bilder in tiefen Schichten großer biologischer Proben aufzunehmen - z.B. Gewebeschnitte, Gehirne, Embryos, Organe, Sphäroide oder Biopsien. Die verbesserte optische Penetrationstiefe erlaubt die Erfassung von Fluoreszenzsignalen ganzer Organe. Das macht Clearing zu einer vielversprechenden Technik zum Beispiel für die Untersuchung neuronaler Netzwerke von Mäusehirnen.

Lightsheet Z.1 vereint die Vorteile von Clearing mit denen der Lichtblattfluoreszenzmikroskopie. Bilden Sie große geklärte Proben mit einer außergewöhnlichen Lichteffizienz, Geschwindigkeit und praktisch ohne Lichtschäden ab. Jetzt können Sie mehrere Kacheln von Z-Stapeln mit Tausenden hochwertigen Bildern aufnehmen. Eine typische Imaging-Geschwindigkeit von 10-40 Bildern/Sekunde reduziert Ihre Imaging-Zeit von Stunden zu Minuten.

Verwenden Sie Lightsheet Z.1 mit LD Plan-Apochromat 20x/1.0 für Experimente mit Gewebe, das mit Scale Medium geklärt wurde (Hama et al, Nat Neurosci. 2011) und einen Refraktionsindex von n=1,38 aufweist. Wenn Ihr wässriges Clearing-Medium einen Refraktionsindex von n=1,45 aufweist, können Sie für die Untersuchung Ihrer Probe entweder die Lightsheet Z.1 Detektionsoptik 20x/1.0 (optimiert für FocusClear™ von CelExplorer Labs, http://www.celexplorer.com, das Einbettungsmedium für CLARITY (Chung et al, Nature 2013) oder die Lightsheet Z.1 Detektionsoptik 5x/0.16 verwenden.

Der Probenhalter mit der leicht zugänglichen Schnittstelle bietet Ihnen die Flexibilität, die Sie brauchen, um die Probenbefestigung an Ihre spezifischen Bedürfnisse anzupassen. Verschiedene Adapter stützen Ihre Probe entweder von unten oder erlauben es Ihnen, die Probe von oben hängend zu befestigen: Sie können immer den perfekten Betrachtungswinkel wählen.

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Als schonendste Methode zur Beobachtung der Entwicklung lebender Proben eröffnet Lightsheet Z.1 eine vollkommen neue Welt der Experimente für Ihre Forschung.

Es folgen einige Anwendungen der Lichtblattmikroskopie, die Ihnen jetzt zur Verfügung stehen:

Erstellen Sie Fluoreszenzaufnahmen von räumlich-zeitlichen Mustern von Zellen während der Embryogenese von Modellorganismen wie dem Zebrafisch und Drosophila melanogaster.

Schnelle Aufnahmen der zellulären Dynamik in Embryonen und kleinen Organismen wie Zellmigration, Herzentwicklung, Blutfluss, Entwicklung des Gefäß- und Nervensystems oder Kalzium-Imaging.

Profitieren Sie von Live-Bildern von 3-D-Zellkulturen, Sphäroiden und Zysten, Gewebe und organotypischen Kulturen. Verwenden Sie Ihre Bilder zur Analyse von Zellmigration, Expressionsmustern und Zellproliferation.

Abbildung von fluoreszenzmarkierten fixierten Proben (Gewebeschnitte, Mäusehirne, Embryos, Spähroide und Biopsien), optisch geklärt mit wässrigen Clearing-Medien mit Brechungsindizes von n=1,38 oder n=1,45. Optimiert entweder für Scale A2, n=1,38, (Hama et al, Nat Neurosci. 2011) oder FocusClear™ (von CelExplorer Labs, http://www.celexplorer.com) n=1,45, das Einbettungsmedium für CLARITY (Chung et al, Nature 2013).

Beobachten Sie sensible Entwicklungsprozesse und führen Sie physiologische Messungen durch.

Verwenden Sie Lightsheet Z.1 für Fluoreszenzaufnahmen von Meeresorganismen wie Ciona, Tintenfisch, Plankton und Plattwürmern.

Erstellen Sie detaillierte Aufnahmen großer Volumina von fixierten und lebenden Proben wie z.B. Zebrafischen und Medakafischen.

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Lichtblattfluoreszenzmikroskopie oder LSFM teilt die Fluoreszenzanregung und -detektion in zwei separate Lichtwege, wobei die Beleuchtungsachse senkrecht auf der Detektionsachse steht. Das bedeutet, dass Sie jeweils nur einen einzelnen, dünnen Bereich Ihrer Probe beleuchten. Sie erzeugen auf diese Weise einen inhärenten optischen Schnitt, indem Sie nur die Fluoreszenz der Fokusebene anregen. Die Lichtblattmikroskopie erfordert weder Lochblende, noch Bildverarbeitung.

Das Licht der Fokusebene wird durch die Pixel einer Kamera gesammelt, anstatt Pixel für Pixel wie beispielsweise in Konfokal- oder anderen Laser Scanning Mikroskopieansätzen. Die Parallelisierung der Bilderfassung auf einem kamerabasierten Detektor ermöglicht schnellere Bildraten mit weniger Anregungslicht als bei vielen anderen Mikroskopietechniken.

Zusammenfassend verbindet LSFM das optische Schnittverfahren mit paralleler Bilderfassung von der gesamten Brennebene. Das macht 3-D-Imaging extrem schnell und sehr lichteffizient.

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